非选择题
1.(2016·湖北省武汉市调研考试)[生物——选修3：现代生物科技专题]
阅读如下材料，回答问题：
材料1：某研究小组对小鼠的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行培养。
材料2：基因敲除是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。
(1)材料1的相关研究属于________工程范畴。制备肝细胞悬浮液时剪碎肝组织，再用________处理，肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2，其主要作用是________。为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的________。
(2)材料2的相关研究属于基因工程的范畴。将某基因插入到基因表达载体的目的基因中，使目的基因________，通过________技术导入ES细胞中。观察基因敲除后生物体性状________，可以判断目的基因是否真正被敲除。医学展望可通过敲除决定某些抗原的基因，获得适合人体移植的其他动物器官，减弱或消除________。
答案：(1)细胞 胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) 维持培养液的pH 抗生素
(2)失活(或灭活、不能表达) 显微注射 是否表达(或“的表现”) 免疫排斥(或排斥反应)
2.(2016·广东省广州市模拟)[生物——选修3：现代生物科技专题]
回答利用农杆菌转化法培育转基因植物的相关问题：
(1)培育转基因植物过程的核心步骤是构建基因表达载体，其目的是使目的基因在受体细胞中________，并且可以通过复制遗传给下一代，同时，使目的基因表达和发挥作用。
(2)构建基因表达载体时，可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的________键。
(3)组成基因表达载体的单体是________。基因表达载体中的启动子是________识别和结合的部位，这种结合完成后才能驱动目的基因通过________(填过程)合成mRNA。
(4)用两种限制酶XbaⅠ和Sac(两种酶切出的黏性末端不同)切割某DNA，获得含目的基因的片段。若利用该片段构建基因表达载体，应选用下图中的何种Ti质粒?________。
(5)将受体细胞培养成植株需要应用________技术，该技术的理论依据是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案：(1)稳定存在
(2)磷酸二酯
(3)脱氧核苷酸 RNA聚合酶 转录
(4)丙
(5)植物组织培养 植物细胞的全能性
3.(2016·河北省五校质量监测)[生物——选修3：现代生物科技专题]
在基因工程中，将目的基因导入受体细胞是一个重要的环节。
(1)如果是将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是________，其次还有________和________等。
(2)如果是将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是_________________________
________。此方法的受体细胞多是____________________________________。
(3)原核生物作为受体细胞的优点是__________________________________
________，最常用的原核细胞是________，
其转化方法是：先用________处理细胞，使其成为________，再将____________________溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的________下促进受体细胞吸收DNA分子，完成转化过程。
(4)重组DNA导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是________。
答案：(1)农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法
(2)显微注射法 受精卵
(3)繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 大肠杆菌 Ca2 感受态细胞 重组表达载体DNA分子 温度
(4)标记基因是否表达
4.(2016·河南省八市检测试题)[生物——选修3：现代生物科技专题]
如图为动物细胞工程操作的流程图。请据图分析回答：
(1)将动物组织中的细胞分散开来获得单个细胞A和B通常用________来处理。将A、B细胞融合形成C细胞的过程常用的诱导因素有________。
(2)如果该图表示抗乙肝病毒的单克隆抗体的制备过程，A细胞是骨髓瘤细胞，则B细胞是从小鼠体内获得的________，在获得该细胞之前，需要向小鼠注射________________。获得D细胞需要经过2次筛选，最终得到________________________________________。
(3)如果该图表示克隆羊的培育过程，过程中涉及的生物技术有________________________________________________________________________
________(写出两种)。如果D表示所获得的克隆动物，则过程中所涉及的生物技术有________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案：(1)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) PEG、灭活的病毒、电激
(2)浆细胞 灭活的乙肝病毒 能产生特定抗体的杂交瘤细胞
(3)动物细胞培养、核移植 动物胚胎早期培养、胚胎移植
5.(2016·江西省宜春中学与新余一中联考)[生物——选修3：现代生物科技专题]
如图是单克隆抗体制备流程阶段示意图，请根据示意图回答下列问题。
(1)单克隆抗体技术是________________技术中最重要的用途。将特定的抗原注入小鼠体内，其目的是使小鼠产生________细胞。
(2)骨髓瘤细胞与某些淋巴细胞混合在一起，细胞融合完成后，在培养基中有________种两两融合的细胞，融合的原理是__________________________，融合的方法除了电激外，还可以用化学诱导剂________或灭活的____________。
(3)从图中可以看出，单克隆抗体制备经过了________次筛选，第一次筛选得到的细胞是________________。
答案：(1)动物细胞融合 浆
(2)三 细胞膜具有一定的流动性 聚乙二醇(PEG) 病毒
(3)两 杂交瘤细胞
6.(2016·广东省七校联考)[生物——选修3：现代生物科技专题]
科学家利用基因工程和细胞核移植技术培育了绿色荧光蛋白转基因克隆猪。其基本流程是：首先从荧光水母中获取目的基因，然后与有关载体重组，并将其导入猪胎儿的成纤维细胞，经培养后再将成纤维细胞核移植入去核的卵母细胞中，最后培养出转基因克隆猪。请回答有关问题：
(1)科学家从荧光水母细胞中获取绿色荧光蛋白基因所运用的酶称为________，并用________的该种酶作用于运载体，才能有利于重组载体的构建。
(2)基因工程中，将重组载体导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是________。
(3)作为核移植受体细胞的去核卵母细胞一般处在________期，常通过________(物理方法)进行激活，使其完成细胞分裂和发育进程。
(4)培养重组细胞时，将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为合成培养基，但通常在培养基中还需要加入适量的________等天然成分。
(5)重组细胞培养至一定阶段还可通过________的方法，从而最终一次获得多个转基因猪。最后这个过程现阶段必须通过胚胎移植才能实现，其实质是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案：(1)限制酶 同种
(2)显微注射法
(3)M中(减数第二次分裂中) 电脉冲(或电激)
(4)血清(或血浆)
(5)胚胎分割、胚胎移植 早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
7.(2016·江西省南昌市模拟卷)[生物——选修3：现代生物科技专题]
如图为某生物的一种多肽酶的基因内部和周围的DNA组成情况。其中标出了转录的起始部位( ini)和终止部位(ter)，翻译的起始密码子对应序列(sta)的第一个碱基的位置，终止密码子对应序列(sto)的第一个碱基的位置，以及基因中内含子的界限(↓)(距离以kb表示，但未按比例画出)。
(1)转录的起始部位称为________________，是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶________的部位。
(2)该基因来自________________(填“基因组文库”或“cDNA文库”)，该文库包括该生物的________(填“全部”或“部分”)基因。
(3)翻译时与密码子发生碱基互补配对的是__________________________________
________上的反密码子，该物质的主要功能是________________________________
____________________________________。
(4)基因工程在原则上只能产生________的蛋白质。蛋白质工程以蛋白质分子的________及其与生物功能的关系作为基础。
答案：(1)启动子 识别与结合
(2)基因组文库 全部
(3)转运RNA 识别并转运氨基酸
(4)自然界已有 结构规律
8.(2016·广东省广州市综合测试)[生物——选修3：现代生物科技专题]
如图一是培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)的示意图，图二是在用MEF细胞制成的饲养层上培养胚胎干细胞(ES细胞)的示意图。
(1)图一所示，制备细胞悬液时，常用________酶来消化剪碎的组织块。配制培养液时，通常需要在合成培养基的基础上添加________等一些天然成分。当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂，这种现象称为细胞的________。
(2)ES细胞是由________中分离出来的一类细胞，ES细胞在功能上具有发育的________。
(3) MEF细胞能够分泌某些蛋白质，其合成到分泌至细胞外的过程是：核糖体→________→囊泡→________→囊泡，再通过________方式分泌到细胞外。在培养液中单独培养ES细胞时，ES细胞容易发生分化，结合图二可推知MEF细胞的作用是________。
(4)在治疗性克隆过程中，细胞核取自患者细胞，这是为了避免向患者移入组织细胞后体内发生________反应。
答案：(1)胰蛋白 血清、血浆 接触抑制
(2)早期胚胎(或原始性腺) 全能性
(3)内质网 高尔基体 胞吐 抑制ES细胞分化
(4)免疫排
